Ushbu tampon DNK harakatlarini o'rganish uchun ishlatilgan
Ushbu tampon kamroq ion kuchi va past buffering hajmi bor. U katta (> 20 kb) DNK elementlarining elektroforeziga mos keladi va tezda almashtirilishi yoki (> 4 soat) jel ishlash muddati uchun qayta ishlanishi kerak.
Buni yodda tutib, siz bir nechta paketlarni ko'rib chiqishingiz mumkin.
Tamponni oson bajarish va qadamlar tezda amalga oshirilishi mumkinligini hisobga olsak, bir vaqtning o'zida bir nechta partiyalarni yaratish vaqtni talab qiladigan yoki tortib olish qiyin bo'lmasligi kerak. Quyidagi ko'rsatmalar yordamida TAE buferini yaratish uchun faqat 30 minut o'tishi kerak. Quyida qanday qilib:
EDTA ning birja yechimini tayyorlang
EDTA (etilendiamin tetraasetik kislota) eritmasi oldindan tayyorlanadi. EDTA pH qiymati taxminan 8.0 ga o'rnatilgunga qadar to'liq probirkaga kiritilmaydi. 0,5 M EDTA 500 ml'lik eritma uchun 93,05 gramm EDTA disodium tuzini (FW = 372,2) torting. 400 milllik deionlangan suvda eritiladi va pH ni natriy gidroksidi (NaOH) bilan moslashtiradi. Solüsyonun yakuniy hajmiga 500 millilitrni qo'shing.
TAE kompaniyasining aktsiyadorlik jamiyati qarorini bekor qilish
242 gramm Tris asosini (FW = 121,14) tortib, taxminan 750 mililitre deiyonize suvda eritib, TAE ning zich joylashgan (50x) eritmasi hosil qiling.
Diqqat bilan 57.1 millilitrli muzlik kislota va 0,5 m EDTA (pH 8.0) 100 mililitrini ehtiyotkorlik bilan qo'shing. Shundan so'ng, yechimni 1 litr hajmgacha sozlang. Ushbu kabinetga eritmasi xona haroratida saqlanishi mumkin. Ushbu tamponning pH qiymati sozlanmagan va taxminan 8,5 bo'lishi kerak.
TAE ning ishchi yechimini tayyorlang
1x TAE buferining ishchi eritmasi soddalashtirilgan eritmani 50x deionlashtirilgan suvda oddiygina suyultirish yo'li bilan amalga oshiriladi.
Oxirgi hal qiluvchi konsentratsiyasi 40 mm. Tris-asetat va 1 mM EDTA. Tampon, agaroz jelini ishlatishda foydalanish uchun tayyor.
Bufer uchun nima kerak
TAE tamponini faqat tez va oddiy ko'rsatmalar to'plamini talab qiladigan vaqt uchun zarur bo'lgan materiallarning soni ortiqcha emas. Siz faqat EDTA disodium tuzi, Tris bazasi va muzli sirka kislotasi kerak bo'ladi.
Tamponni tayyorlash ham zarur bo'lganda pH o'lchovi va kalibrlash standartlarini talab qiladi. Bundan tashqari siz 600 mililitrli va 1500 mililitrlik qozon yoki shishalarni, shuningdek, silindrlarni bitirishga ehtiyoj sezasiz. Nihoyat, siz deiyonizatsiya qilingan suvga ehtiyoj sezasiz, barlarni aralashtirasiz va plitalarni aralashtirasiz.
O'rash
Maktab saytida, ish joyida yoki sizning uyingiz kabi boshqa joylarda buferni qaerdan oldingiz? TAE bufer uchun yuqorida ko'rsatilgan barcha materiallarga ega ekanligingizga ishonch hosil qilishdan oldin inventarni tekshiring.
Agar siz materiallar uchun pul to'lashni xohlamasangiz, uyingizdan tashqarida tampon qilishni tavsiya qilamiz. Onlaynda kerakli materiallarni osongina buyurtma qilish yoki ular uchun maxsus do'konga tashrif buyurishingiz mumkin.