Bu tamponlar neytral pHda biologik ilovalar uchun ishlatilishi mumkin
Fosfor kislotasi uchun uchta pKa qiymatlari (CRC Kimyo va Fizika Al-kitobi) dan 2.16, 7.21 va 12.32 ni tashkil qiladi. Monosodyum fosfat va uning konjugat bazasi, disodium fosfat odatda bu erda ko'rsatilgandek, biologik qo'llanmalar uchun 7 atrofida pH qiymatlarining buferlarini ishlab chiqarish uchun ishlatiladi.
Ushbu tamponni yaratish TAE va TBE buferlarini yaratishdan biroz kattaroq. Biroq, bu juda qiyin emas. Oddiy o'rtacha. Ushbu tamponni qamash uchun taxminan 10 minut o'tishi kerak. Mana qanday qilib.
1. Buffer xususiyatlariga qaror bering
Tamponni tayyorlashdan oldin siz avval o'zingiz istagan molaritani, qanday hajmni va kerakli pH qiymatini bilishingiz kerak. Ko'pgina tamponlar 0,1 dan 10 m gacha kontsentratsiyalarda eng yaxshi ishlaydi. PH kislota / konjugat pKa ning 1 pH birligi ichida bo'lishi kerak. Oddiylik uchun, bu namuna hisoblash 1 litr tampon uchun bo'ladi.
2. Asitning tayanch nisbatini aniqlang
Xenderson-Hasselbalch tenglamasini (quyida) ishlatish uchun kerakli pH ning tamponini yaratish uchun kislota bazasiga qanday miqdorda kerakligini aniqlang. Kerakli pH qiymatiga yaqin bo'lgan pKa qiymatidan foydalaning va bu nisbat pKa ga mos keladigan kislota-baz konjugat juftligiga tegishlidir.
HH tenglama: pH = pKa + log ([base] / [kislota])
PH 6.9 tampon uchun, [baz] / [kislota] = 0.4898
[Acid] ni almashtiring va [base]
Tamponning kerakli molariti [kislota] + [base] ning yig'indisidir.
1 M bufer uchun [Base] + [Acid] = 1 va [Base] = 1 - [Acid]
Buni nisbati tenglamaga almashtirish orqali, 2-bosqichdan quyidagilarni olasiz:
[Kislota] = 0,612 mol / L
Solish uchun [kislota]
Tenglama yordamida: [Base] = 1 - [Acid], siz hisoblashingiz mumkin:
[Boz] = 0.3288 mol / L
3. kislota va konjugat asoslarini aralashtiring
Henderson-Hasselbalch tenglamasini ishlatganingizdan keyin kislotaning bazaga qanday miqdorda kerakligini hisoblash uchun foydalangandan so'ng, monosodyum fosfat va disodium fosfatning to'g'ri miqdorlarini qo'llanganda, 1 litr eritma ostida tayyorlang.
4. pH ni tekshiring
Tampon uchun to'g'ri pH darajasiga erishilganligini tasdiqlash uchun pH probu foydalaning. Fosforik kislota yoki natriy gidroksidi (NaOH) yordamida kerakli darajada bir oz tartibga soling.
5. Ovozni to'g'rilash
Kerakli pH ga yetganda, tampon hajmini 1 litrgacha olib keling. So'ngra kerakli tamponni suyultiringiz. Shu bilan tamponni 0,5 M, 0,1 M, 0,05 M oralig'ida yoki o'rtasida biron bir narsa yaratish uchun suyultirish mumkin.
6. Bufer uchun maslahatlar
Unutmangki, pKa osongina aniq qiymat bilan o'lchanmaydi. Turli manbalardan olingan adabiyotlarda ozgina farqli qiymatlar mavjud bo'lishi mumkin.
7. Sizga nima kerak
Tamponni yaratish uchun siz uchta moddaga kerak bo'ladi, qolgan qismlar esa uskunadir. Bu moddalar monosodyum fosfat, disodium fosfat va pH ni sozlash uchun fosforik kislota yoki natriy gidroksiddir.
Bundan tashqari sizda pH o'lchagich va prob va tegishli laboratoriya jihozlari kerak bo'ladi. Bu volumetrik shishani, tsilindrni, qandilni va stir barlarni o'z ichiga oladi.
Va nihoyat, sizda qaynoq issiq shlyapa kerak bo'ladi.