Shuningdek, RFLP tahlili deb ataladigan bu usul, individual odamlarning genetik kodlarida polimorfizmlarning afzalliklaridan foydalanadi. Turlarning barcha a'zolari aslida bir xil genetik tarkibga ega bo'lsa-da, bu kichik farqlar fenotipning o'zgarishi, masalan, tashqi ko'rinish yoki moddalar almashinuvi, shaxslar o'rtasida mavjuddir.
RFLP: Analiz uslubi va ilovalari
RFLPni tahlil qilish usuli DNKning ma'lum bir hududini ma'lum cheklovli fermentlar bilan kesib olib, so'ng agaroz jel elektroforez bilan ajratib, fragmentlar sonini va nisbiy o'lchamlarini aniqlashni o'z ichiga oladi.
Cheklash enzimi - bu ferment, oqsil molekulasi, bu taqiqlash joylarida DNKni kamaytiradi. Darhaqiqat, DNK namunasi buzilgan fermentlar tomonidan singib ketadi. Olingan qismlar uzunliklariga qarab ajralib turadi va sinov qilingan har bir kishi uchun parcha kattaligi namunasi farqlanadi.
To'liq RFLP jarayoni problarni markalash, DNKning bo'linishi, elektroforez, blotlash, hibridizatsiya, yuvish va autoradiografiya talab qiladi. Aniqlangan RFLP elektroforezda bir-biridan ajralganidan keyin DNK fragmentlarini ko'rish va tahlil qilish mumkin bo'lgan rentgen kino yordamida autoradiografiyada ko'zdan kechiriladi.
RFLP tahlillari uchun ba'zi bir dasturlar quyidagilarni o'z ichiga oladi:
- DNK barmoq izlari . Sud ekspertlari jinoyat sahnalarida to'plangan namunaviy namunalar asosida gumon qilinuvchilarni aniqlash uchun RFLP tahlilidan foydalanishi mumkin.
- Otalik. RFLP shuningdek, ota-onani aniqlashda yoki ota-bobolarni kuzatishda ishlatiladi.
- Genetika xilma. Texnika yovvoyi hayotning evolyutsiyasi va migratsiyasini o'rganishda, hayvonlarning populyatsiyasida naslchilik namunalarini o'rganishda va muayyan kasalliklarni aniqlashda va tashxislashda foydalanish mumkin.
RFLP genomlaridagi o'zgarishlarni aniqlash usuli genom xaritalash va genetik kasalliklarni tahlil qilishning muhim vositasidir. Agar muayyan kasallik genining joylashuvi muayyan xromosomalarda topilsa, unda tadqiqotchilar oila a'zolarining DNKlarini kasallik bilan tahlil qiladilar, keyin esa RFLP allellarida o'xshash naqshlarni topadilar.
Bir kasallik geni lokalize qilinganidan so'ng, boshqa oila a'zolarida RFLP tahlilini o'tkazish mutant genlarni tashuvchisi yoki umumiy kasallik xavfi signalini ko'rsatishi mumkin. RFLP texnikasi hozirgi kunda keng qo'llanilmayotganini, sud tibbiyoti sohasida va boshqa bir qator sohalarda DNK tahlil qilish uchun yangi, yanada mustahkam usullarni qo'llashni e'tiborga olish kerakligini ta'kidlash kerak.
Tahlilning salbiy jihati
Afsuski, RFLP tahlil texnikasi zerikarli va sekin. Ko'p miqdorda namuna DNKni talab qilishdan tashqari - namuna odatda DNKning namunalari uchun nisbatan katta bo'lgan to'rtdan bir kattalikka ega bo'lishi kerak - prob probirkasidan yuvishga va autoradiografiyaga qadar bo'lgan jarayon, to'liq oy tugashi kerak.
Inson genomu loyihasidan olingan natijalar juda ko'p RFLPga bo'lgan ehtiyojni almashtirdi. Loyiha inson hujayralarida, inson genomida va inson genomidagi barcha genlarni aniqlash uchun aniqlangan DNKning barcha ketma-ketligini aniqlashga imkon berdi.