Qanday muzlatiladi? - Bakterial madaniyatni quriting (Liyofilizatsiya)

Liyofilizatsiya yoki muzlatish bilan quritish - qisqa laboratoriya usuli

Liyofilizatsiya yoki kristallanish deb ataladigan muzlatgichni quritish, muzlatilgan (keyin vakuum ostiga qo'yilgan) mahsulotni suvdan olib tashlash jarayoni bo'lib, unda muzning suyuqlik fazasidan o'tmagan holda bug'dan bug'ga o'tishi mumkin. Buz (yoki boshqa muzlatilgan erituvchilar) sublimatsiya jarayoni orqali mahsulotdan chiqariladi va bog'langan suv molekulalari desorptsiya jarayonida chiqariladi.

Lyophilization asoslari

Bakteriyani, qo'ziqorinni, xamirturushni yoki boshqa mikroorganizmlar madaniyatini uzoq vaqt davomida saqlashning eng yaxshi usullaridan biri muzlatish jarayonini qo'llashdir. Ushbu qisqa laboratoriya jarayoni sizning madaniy kollektsiyangizni saqlab qoladigan har qanday sotiladigan muzlatgich bilan amalga oshirilishi mumkin. Liyofilizatsiya quritishning eng murakkab va qimmatbaho shakli bo'lgani uchun jarayon odatda nozik, yuqori darajada issiqlikka sezgir materiallar bilan cheklanadi. Muzlash bilan zararlanmagan moddalar odatda muzlatilgan saqlash keraksiz bo'lishi uchun liyofillashtirilgan bo'lishi mumkin.

Ushbu jarayon uch soatdan kam davom etishi va 24 soatdan ortiq davom etishi mumkin.

Lyophilizationning bosqichma-bosqich jarayoni

1. Birinchidan, bir kecha-kunduz madaniyatini yoki maysazorini, LBdagi mikroorganizmni yoki boshqa kerakli ozuqa qoldig'ini o'stiring.

2. Keyinchalik, avtoklavlash bilan steril kıvırcık qopqoq shishalarini tayyorlang, kepler (kauchuk tıkaçlar) yumshoq tarzda yuqoriga qo'yiladi. Avtotklavishdan oldin naychalar ichidagi madaniyat identifikatori bilan bosilgan qog'oz yorliqlarini joylashtiring. Shu bilan bir qatorda, sterillik uchun mo'ljallangan qopqoqli naychalardan foydalaning.

1. Plastinkaga 4 ml liyofilizatsiya tamponini qo'shing. Kerak bo'lsa, hujayralar steril shisha tayoq yordamida to'xtatiladi.

2. Madaniyat suspenziyasini sterillangan shisha ichiga tezlik bilan topshiring. Shishaga taxminan 1,5 mL qo'shing. Kauchuk qopqoq bilan yoping.

3. Flakonlarni -20 darajagacha Cselius dondurucuda joylashtirib, shishalar ichidagi madaniy suspenziyani muzlatib qo'ying.

1. Madaniyatlar muzlatilganidan so'ng, muzlatgichni quritgichga aylantirib, tegishli harorat va vakuum sharoitlarini barqarorlashtirish uchun vaqt ajratib tayyorlang. Buni siz ishlab chiqarayotgan donduruc-fen mashinasining ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq bajaring.

2. Ehtiyotkorlik bilan va aseptik tarzda, shisha idishlaringizni shisha idishga solib qo'ying, shunda namlik dondurarak quritish jarayonida qochib qutulishi mumkin va idishlarni muzlatish kamerasiga joylashtirishi mumkin. Vakuumni kameraga ishlab chiqaruvchi ko'rsatmalariga muvofiq qo'llang.

3. Madaniyat vaqtini butunlay liyofilizatsiyaga (quritish) imkon bering. Bu har bir namunaning hajmiga va qancha namunaga bog'liqligiga qarab, bir necha soatdan kechgacha davom etishi mumkin.

4. Namunalarni muzlatish kamerasidan chiqarib, ishlab chiqaruvchining yo'riqnomasiga muvofiq olib tashlang va shisha idishni zangrab oluvchi qopqoq bilan zudlik bilan yopib qo'ying, shundan so'ng kıvrım tepalari ustiga bosing.

5. Liyofilizatsiyalangan madaniy to'plamni xona haroratida saqlang.

Sizga kerak bo'lgan mahsulotlar

• Muzlatgich
• Oziq moddalar yoki boshqa tegishli plitalar (va madaniyatni rivojlantirish uchun inkubator)
• Shisha tayoq
• Liyofilizatsiya bufferi
• Kauchuk qopqoqli krimp-idishli shisha (va qopqoqlarni qo'llash uchun kıvırtma)
• Sovutgich

<sub>Malumot:

SP Ilmiy. Muzlatishning asosiy printsiplari. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/</sub>